【摘要】:为了解不同因素对培养基pH值所造成的影响，采用奥豪斯精密pH计对14种培养基灭菌前和灭菌后的pH值进行测定，并将结果进行比较。

关键词: PH计；培养基；pH值；培养基成分；灭菌时间；校准试剂；稳定性

1 材料与方法

1．1 仪器与试剂：奥豪斯电子天平，，美国奥豪斯精密pH计STARTER 3100-F，0℃ ～ 100 ℃温度计。供试培养基: 细菌学蛋白胨 、平板计数琼脂、志贺氏菌增菌肉汤、孟加拉红、葡萄糖琼脂、乳糖胆盐发酵管、伊红美兰琼脂、乳糖蛋白胨、无水葡萄糖，所有培养基均在有效期内使用。pH校准试剂: 1mol/LNaOH。

1．2 方法

1．2．1 测定方法上述培养基除细菌学蛋白胨和无水葡萄糖外均按生产厂商提供的使用说明配制。每种培养基配制后均分装两瓶并用奥豪斯pH计测定pH值，使两瓶培养基的pH值相同。其中一瓶不对培养基的pH 值进行调整，另一瓶用pH校准试剂对pH值进行调整。pH值的调整及灭菌温度和时间均严格按照使用说明进行。对灭菌后的培养基逐一进行pH值测定。细菌学蛋白胨分别配制成0．1%蛋白胨水、1%蛋白胨水、10%蛋白胨水。每种培养基各分装两瓶。一瓶不对培养基的pH值进行调整，另一瓶用pH校准试剂将pH值调整到7．1±0.1。对未调整过pH值的培养基和用pH校准试剂调整后的培养基再次各分装两瓶，分别用于121℃、20min 和115℃、15min灭菌实验。每次分装及pH调整前后均测定pH值，使分装后及pH值调整前后的pH值相同。对灭菌后的培养基逐一进行pH值测定。

无水葡萄糖分别配制成0．1%葡萄糖溶液、0．5%葡萄糖溶液、1%葡萄糖溶液。每种培养基各分装两瓶。一瓶不对培养基的pH 值进行调整，另一瓶用pH校准试剂对pH值进行调整。由于葡萄糖溶液对1mol/LNaOH敏感，故统一添加半滴( 约0.025ml)1mol/LNaOH后测定pH值。对未调整过pH的培养基和用pH校准试剂调整后的培养基再次各分装两瓶，分别用于121℃和115℃灭菌实验。每次分装及pH 值调整前后均测定pH值，使分装后及pH 调整前后的pH 值相同。对灭菌后的培养基逐一进行pH 值测定。

为了避免测定时溶液温度对pH值测定结果带来的误差。所以液体培养基统一在30℃时测定pH值。由于含有琼脂的培养基低于35℃即凝固，故此类培养基统一在35℃时测定pH值。

以上为简单的实验方法，仅供参考。