影响培养基pH值稳定性所涉及的因素较多：

能否正确把握这些因素是实施培养基质量控制的重要内容之一。奥豪斯通过实验结果发现测量pH值时的温度、培养基成分、灭菌时间与温度、灭菌前是否加入校准试剂(1mol/LNaOH)等对培养基pH值的稳定性均有不同程度的影响。

根据不同温度测得的同一培养基的pH值结果来看，培养基pH值的变化随着测量时温度的降低而升高。这是由于温度升高时溶液中的离子游离数增多，pH值偏酸;反之，当温度降低时离子游离数减少，pH值偏碱所造成的。由于微生物的最适生长温度多在37℃左右，为了使制备好的培养基pH值更接近细菌生长、繁殖所需的pH值，在调整、测定培养基pH值时的温度宜在25℃-35℃。并尽量使测定pH值时的温度与该培养基用于培养时的温度一致，从而尽可能减少由于温度不同造成的pH值误差。

蛋白胨作为氮源被微生物生长繁殖所利用。它在培养基中还具有缓冲作用和受高热不凝固、遇酸不沉淀等优点。根据实验结果来看，不同含胨量培养基pH值变化的平均值差异具有统计学意义。培养基含胨量的高低与pH值变化的绝对值呈反比关系。这表明蛋白胨的缓冲作用与pH值的稳定性密切相关。葡萄糖、乳糖等作为碳源被微生物所利用。但糖类不耐热的特性会使糖类在高温条件下产生有机酸而使pH值下降。糖的浓度越大，pH值下降越大；pH值下降越大，糖类分解越多。根据实验结果来看也确实如此。不同含糖量培养基pH变化的平均值差异具有统计学意义。含糖量的高低与 pH值变化的绝对值呈正比关系。葡萄糖溶液的浓度对pH值影响较大，随着葡萄糖浓度的升高，影响就更为明显。

在实际操作中用1mol/LNaOH调整培养基pH值时，应根据培养基成分及灭菌温度将培养基的pH值适当调高0．01～0．15，避免高压灭菌后pH值变化幅度过大而需要重新进行pH值调整。与过去自制培养基相比，现今商品化脱水培养基以其配制省时省力、使用方便简易，并可降低因人为因素造成的每一批次培养基之间的差异而被广泛使用。