当前位置:首页 > 奥豪斯微量移液器作为抗生素微生物检定法的加样工具

奥豪斯微量移液器作为抗生素微生物检定法的加样工具

[导读]本文从加样量的分析、加样时间的分析、并分析了3种加样方法的比较,以及介绍了微生物抗生鉴定法所需要的具体仪器。

1 奥豪斯移液器加样量的分析

国外药典和《中国药典》及其以往版本都采用控制不锈钢小管的容积来控制加样量。通过规定不锈钢小管高度、内径误差范围,来控制不锈钢小管的容积误差,从而控制加样量的准确性。现行《中国药典》2010年版规定,不锈钢小管的内径为(6.0±0.1)mm ,高为(10.0±0.1)mm ,外径为(7.8±0.1)mm 。以装满小钢管为度来确定抗生素溶液的加入量,因不锈钢小管容积的允许误差偏大,精密度远远超出了分析要求。对滴加供试液的方法各国药典都没有规定具体的要求。

2 加样时间的分析

在滴加供试液过程中,因各管分别滴加,顺序有先后,加样时间不一致,由于溶液在加入不锈钢小管后即开始向培养基中渗透,先加者先渗透,对扩散时间(T)会产生一定的误差,所以滴加溶液的间隔时间不可过长,以免影响测定结果。 《中国药品检验标准操作规范》规定:滴加溶液的顺序为SH→TH→TL→SL ,以消除加样操作的系统误差。 连续滴加双碟数目不超过5个,如果1份溶液滴加双碟数目过多,可分组滴加,以缩短滴加溶液的间隔时间。

3 种加样方法比较

3.1 实验仪器及试剂

玻璃滴管(自制);1ml卡介苗注射器;奥豪斯微量移液器;钢管放置器;十万分之一奥豪斯电子天平(奥豪斯仪器(上海)有限公司);压力蒸汽灭菌器(上海,博迅); ZY-300Ⅳ型多功能微生物自动测量分析仪(北京,先驱);恒温水浴箱;隔水式培养箱(上海,博迅);冰箱(青岛,海尔);不锈钢小管;效价测定专用双碟以及常用玻璃仪器。 培养基和磷酸盐缓冲液等。

3.2 统计分析

采用微量移液器定量加样,对于扩散时间(T)和抗生素在小钢管中的量(M)的控制明显优于玻璃滴管液面目测法和用卡介苗注射器定量加样法,生物统计中的回归和可信限率具有明显的相关性。

用奥豪斯微量移液器定量加样。由于各管所加体积是一定的,可以消除先加先渗透到琼脂层带来的体积误差,实验过程中不需要考虑在滴加过程中各管已渗透进入培养基中的抗生素溶液体积和抗生素溶液在小管中的液面位置,这对加样操作带来了很大的便捷, 大大地减少了抗生素在小钢管中的量(M)的误差和扩散时间(T)的误差。



相关文章